羅格於(Ben Wright 配音)和阿尼塔(Lisa Davis 配音)夫婦飼養的大麥町狗龐哥(Rod Taylor 配音)與帕蒂塔(Cate Bauer 配音)喜結良緣,共組成歡樂家庭。沒過多久,帕蒂塔生育了十五只小狗。正在一家人享受小狗帶來的歡樂之際,阿尼塔的女上司克魯拉·德維爾(Betty Lou Gerson 配音)打起了壞主意。她正在為製作一件黑白斑點的大衣而發愁,於是她派人綁走了小狗,和其他八十四只大麥町幼犬一同關在鄉間的空屋裏。發現孩子失蹤的龐哥與帕蒂塔,通過狗吠召集全市的狗類,一同找尋自己的孩子,一場小狗救援記就此展開,龐哥與帕蒂塔能否在小狗被宰殺之前營救他們逃出呢……
《101斑點狗》是迪士尼1961年推出的第17部經典動畫,取材自Dodie Smith 的作品。